每種物質就有固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是紫外可見分光光度計原理定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據(jù)物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。
以下是紫外可見分光光度計的原理和基本操作步驟:
原理:
1.根據(jù)比爾定律,溶液中物質的吸光度與其濃度成正比,可用來定量分析。
2.光通過樣品時,被樣品吸收的光強度與入射光強度之比即為吸光度。
操作步驟:
1.打開電源,并預熱一段時間以穩(wěn)定儀器性能。
2.調節(jié)波長選擇旋鈕,選擇所需的測試波長(紫外或可見光范圍)。
3.使用空白試劑(溶劑)校準儀器,將空白試劑置于樣品室中,調零吸光度。
4.取待測溶液樣品,將其置于樣品室中,關閉樣品室,記錄吸光度讀數(shù)。
5.如果需要測定多個波長下的吸光度,依次調節(jié)波長選擇旋鈕進行測量。
6.根據(jù)實驗需要,可以繪制吸光度與波長的曲線,進行定量或定性分析。
7.測量結束后,清潔樣品室和光學元件,關閉儀器并保存數(shù)據(jù)。
注意:在操作紫外可見分光光度計時,應注意避免樣品污染、保持儀器清潔,并按照儀器說明書和操作手冊進行操作。